高效液相基础操作规程
一、实验准备阶段
1. 配制流动相：根据实验需求，选择合适的溶剂配制流动相。确保所使用的流动相不会对实验或设备造成损害，如堵塞或腐蚀。（水相需用超纯水，并每天更换，以免长藻堵塞管道，水相加盐时需超声混匀后过膜。）滤膜分有机和水相的，使用时记得区分。过膜后流动相需进行超声脱气30分钟。
2. 样品准备：对样品进行必要的净化处理，通过微孔滤膜（如0.45um或者0.22um）过滤，确保样品是澄清溶液。将处理好的样品装入合适的液相色谱样品瓶中待用。（样品量一般在0.5ml以上，避免进样针吸不了样品，如样品量较少，可以在小瓶内加入内衬管后再把样品装入小瓶。）
二、仪器操作阶段
1. 开机：按照仪器说明书的指引，正确打开高效液相色谱仪的电源，并启动相关软件。
2. 冲洗与平衡：对流动相每个管道都先进行排气泡，然后调用方法平衡仪器及色谱柱，确保仪器压力正常（要求压力波动少于1bar），基线稳定。并进行泵压力记录，方便后续仪器有问题进行查看。
3. 设置参数：根据实验需要，在仪器的控制软件中设置或调用参数，包括流速、流动相组成、进样量、柱温、检测波长等。
三、运行与监控阶段
1. 运行序列：根据编辑好的进样序列表，运行序列方法分析样品。在运行过程中，密切观察仪器的状态和色谱图的变化。
2. 数据记录：实时记录实验数据，包括色谱图、峰面积等。确保数据的准确性和完整性。
四、数据分析与处理阶段
1. 积分色谱峰：对色谱图中的色谱峰进行积分，获得峰面积。
2. 定量计算：根据实验需要，使用不同的方法进行定量计算，如外标法、内标法、面积百分比法等。
3. 定性分析：利用数据软件的对应功能，得到光谱图及质谱图，获得定性信息。
五、关机与清洁阶段
1. 清洁与保养：对仪器进行必要的清洁和保养工作，如冲洗色谱柱、更换二通冲洗液相系统等，避免管道堵塞，确保仪器的良好状态。
2. 关机：在完成所有实验后，退出相关软件，并关闭高效液相色谱仪的电源。#实验室仪器 #仪器仪表 #高效液相色谱仪 #液相色谱 #液相 #药学 #仪器维修
一、实验准备阶段
1. 配制流动相：根据实验需求，选择合适的溶剂配制流动相。确保所使用的流动相不会对实验或设备造成损害，如堵塞或腐蚀。（水相需用超纯水，并每天更换，以免长藻堵塞管道，水相加盐时需超声混匀后过膜。）滤膜分有机和水相的，使用时记得区分。过膜后流动相需进行超声脱气30分钟。
2. 样品准备：对样品进行必要的净化处理，通过微孔滤膜（如0.45um或者0.22um）过滤，确保样品是澄清溶液。将处理好的样品装入合适的液相色谱样品瓶中待用。（样品量一般在0.5ml以上，避免进样针吸不了样品，如样品量较少，可以在小瓶内加入内衬管后再把样品装入小瓶。）
二、仪器操作阶段
1. 开机：按照仪器说明书的指引，正确打开高效液相色谱仪的电源，并启动相关软件。
2. 冲洗与平衡：对流动相每个管道都先进行排气泡，然后调用方法平衡仪器及色谱柱，确保仪器压力正常（要求压力波动少于1bar），基线稳定。并进行泵压力记录，方便后续仪器有问题进行查看。
3. 设置参数：根据实验需要，在仪器的控制软件中设置或调用参数，包括流速、流动相组成、进样量、柱温、检测波长等。
三、运行与监控阶段
1. 运行序列：根据编辑好的进样序列表，运行序列方法分析样品。在运行过程中，密切观察仪器的状态和色谱图的变化。
2. 数据记录：实时记录实验数据，包括色谱图、峰面积等。确保数据的准确性和完整性。
四、数据分析与处理阶段
1. 积分色谱峰：对色谱图中的色谱峰进行积分，获得峰面积。
2. 定量计算：根据实验需要，使用不同的方法进行定量计算，如外标法、内标法、面积百分比法等。
3. 定性分析：利用数据软件的对应功能，得到光谱图及质谱图，获得定性信息。
五、关机与清洁阶段
1. 清洁与保养：对仪器进行必要的清洁和保养工作，如冲洗色谱柱、更换二通冲洗液相系统等，避免管道堵塞，确保仪器的良好状态。
2. 关机：在完成所有实验后，退出相关软件，并关闭高效液相色谱仪的电源。#实验室仪器 #仪器仪表 #高效液相色谱仪 #液相色谱 #液相 #药学 #仪器维修
